一、实验要求
1. 掌握薄层板的制备及薄层层析的操作方法
2．掌握吸附剂活度测定的原理及方法
3．应用薄层层析法检测中草药化学成分

二、实验原理
    当一个混合物被倒入固定相中，并用另一个流动相洗脱时，由于混合物中各组份与固定相和流动相的相互之间的作用不同，致使各组份通过固定相的速率不同，从而使混合物中各组份得到分离。

三、实验仪器与试剂
仪器：烘箱，玻璃板，研钵，水浴锅，天平，薄层涂布器
试剂：氧化铝，纤维素，聚酰胺, 硅胶, 羧甲基纤维钠，甲酸，0.01%二甲基黄、苏丹红，靛酚蓝，苯，偶氮苯，对甲氧基偶氮苯，苏丹黄，苏丹红，对氨基偶氮苯，四氯化碳

四、实验步骤
（一）薄层板的制备
1. 加粘合剂的薄层涂布法
（1）氧化铝薄层
将吸附剂置于薄层涂布器中，调节涂布器的高度，向前推动，即得均匀薄层。操作时，将氧化铝粉均均地铺在玻璃板上，匀速向前推动。
（2）纤维素薄层
一般取纤维素粉1份加水约5份，在烧杯中混合均匀后，倒在玻璃板上，轻轻振动，使涂布均匀，水平放置，待水分蒸发至近干，于100±2℃干燥30~60分钟即得。
（3）聚酰胺薄层
取锦纶丝（无色干净废丝即可）用乙醇加热浸泡2~3次，除去腊质等。称取洗净的锦纶丝1克，加85%甲酸10ml，在水浴上加热使溶，再加70 %乙醇6 ml。继续加热使完全溶解成透明胶状溶液。将此溶液适量倒在水平放置的，用清洁液洗净的玻璃片上，并自然向周围推匀，厚度约0.3 mm，薄层太厚时，干后会裂开。将铺好的薄层水平放在盛温水的盘上，使盘中的水蒸汽能熏湿薄层，盘子加玻璃板盖严密，薄板放置约1小时完全固化变不透明白色，再放数小时后，泡在流水中洗去甲酸，先在空气中晾干，后在烘箱中0℃恒温加热活化15分钟，冷后置干燥器中贮存备用。

2．加粘合剂薄层的涂布法
（1）硅胶G薄层取硅胶G或硅胶GF一份，置烧杯中加水约5份混合均匀，放置片刻，随即用药匙取一定量，分别倒入涂布器中，推动涂布，均匀涂布成0.25~0.5 mm厚度，在水平位置放置，待薄层发白近干，于烘箱中100℃活化0.5~1小时，冷后贮于干燥器内备用。活化温度和时间可依需要调整，一般检识水溶性成分或一些极性大的成分时，所用薄层板只需在空气中自然干燥，不经活化即可贮存备用。
（2）硅胶（H）羧甲基纤维钠（CMC-Na）薄层取羧甲基纤维素0.2 g，溶于25 ml水中，在水浴上加热搅拌使完全溶解，倒入烧杯中，加薄层层析用硅胶（颗粒度10~40 μm的约6~8 g）混成均匀的稀糊，按照硅胶G薄层涂布法制备薄层，让其自然阴干，100℃下烘30分钟。冷后于干燥器内备用。氧化铝薄层、氧化铝羧甲基纤维钠薄层的制备方法同上，一般所需要氧化铝比硅胶稍多。 目前国内外市场有预先制好的薄层板，底板用玻璃、塑料、铝片等。可按需要用玻璃刀划割，也有用剪刀剪成所要的大小，使用方便，价格贵些。

3．特殊薄层的制备
根据分离工作的特殊需要，可制成以下几种特制薄层。
（1）酸、碱薄层和pH缓冲薄层
为了改变吸附剂的酸碱性，以改进分离效果，可在吸附剂中加入稀酸溶液（如0.1~0.5 N草酸溶液）代替水制成酸性氧化铅薄层使用。硅胶微呈酸性，可在铺层时用稀碱溶液（如0.1~0.5 N氢氧化钠溶液）代替水制成碱性的硅胶薄层。可用醋酸钠、磷酸盐等不同pH的缓冲液代替水铺层，制成一定pH缓冲的薄层。
羧甲基纤维素钠溶液一般用0.5~1%浓度，宜预先配制后静置，取其上层澄清溶液应用，则所制得的薄层表面较为细腻平滑。常用0.8%浓度。CMC-Na系中粘度、300~500厘泊（粘度单位）。CMC-Na系碳水化合物，调制时应在水浴上进行。活化温度不应过高，防止碳化。